Dalam sebuah reaktor batch dapat
ditentukan jumlah substrat [So] dan enzim [Eo]. Hubungan
konsentrasi produk atau substrat dan waktu dapat digambarkan. Harga slope awal
dari kurva ini diestimasi (v = d[P]/dt|t=0 = -d[S]/dt|t=0).
Setelah itu, harga v dicari hubungannya dengan [Eo] dan [So]
di dalam reaktor. Banyak eksperimen yang dapat digunakan untuk mencari hubungan
yang umum antara v dengan data [S].
Tetapi penentuan harga Km
secara tepat dari sebuah grafik sangat sulit dilakukan. Oleh karena itu,
digunakan metode lain untuk menganalisis data yang ada, yaitu Lineweaver-Burk
Plot, Eadie-Hofstee Plot, dan Hanes-Woolf Plot.
A. Double-reciprocal Plot (Lineweaver-Burk Plot)
Persamaan
linear yang digunakan untuk double-reciprocal plot adalah:
Grafik hubungan 1/v dan
1/[S] merupakan suatu garis lurus dengan slope Km/Vm
dan intercept sumbu y 1/Vm. Double-reciprocal plot
memberikan estimasi yang baik dalam menentukan harga Vm,
tetapi tidak untuk harga Km. Karena error yang
didapatkan pada data setiap titik untuk double-reciprocal plot tidak
simetri, penggunaan analisis regresi (least square) harus dilakukan
dengan hati-hati. Data yang diperoleh pada konsentrasi substrat rendah lebih
mempengaruhi perubahan slope dan intersept dibandingkan dengan
data yang diperoleh pada konsentrasi substrat tinggi.
Gambar I.10 Double-reciprocal (Lineweaver-Burk) plot (Shuler and Kargi, 1992)
B.
Eadie-Hofstee Plot
Persamaan linear yang
digunakan untuk Eadie-Hofstee plot adalah:
Grafik hubungan antara v
dan v/[S] merupakan suatu garis lurus dengan slope Km
dan intersept sumbu y Vm. Eadie-Hofstee plot
dapat memberikan error yang cukup besar karena terdapat variabel v
pada kedua sumbu koordinat.
Gambar I.11 Eadie-Hofstee plot (Shuler and Kargi,
1992)
C. Hanes-Woolf Plot
Persamaan linear yang
digunakan untuk Hanes-Woolf plot adalah:
Grafik hubungan [S]/v
dan [S] merupakan garis lurus dengan slope 1/Vm
dan intersept sumbu y Km/Vm. Plot
ini digunakan untuk menentukan harga Vm yang lebih akurat.
Gambar I.12 Hanes-Woolf plot (Shuler and Kargi, 1992)
0 comment:
Post a Comment